Santa Maria della Spina, numită iniţial Santa Maria di Pontenovo, este un alt reper religios notabil al cărui principal merit se referă la faptul că biserica se afirmă drept una dintre cele mai alese expresii ale stilului gotic. Într-adevăr, edificiul nu impresionează prin dimensiunile sale, ci prin formula sa arhitecturală şi prin elementele artistice decorative exterioare ce variază de la cuspide, timpane şi tabernacule la diverse sculpturi concepute de Andrea Pisano, Nino Pisano, Tommaso Pisano, Lupo di Francesco şi Giovanni di Balduccio.
Spre deosebire la exteriorul său bogat, interiorul bisericii Santa Maria della Spina este destul de auster, însă fără îndoială merită explorat. O curiozitate cu privire la acest stabiliment este că Santa Maria della Spina din prezent nu ocupă locul iniţial pe care a fost construită în 1230, biserica fiind dezmembrată şi apoi reasamblată pe un loc mai înalt ca urmare a periclitării din partea apelor ameninţătoare şi ale Râului Arno. De asemenea, numele stabilimentului actual este datorat legendei unui spine presupus a fi aparţinut coroanei de spini purtate de Isus, şi care a fost adus la Santa Maria în cursul secolului al XIV-lea.